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實時熒光定量PCR技術(shù)介紹

實時熒光定量PCR（qPCR）是一種在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號累積實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對初始模板進(jìn)行定量分析的方法。該技術(shù)于1996年由美國AppliedBiosystems公司推出，它的出現(xiàn)解決了傳統(tǒng)PCR不能對初始模板定量分析的問題。熒光定量PCR具有準(zhǔn)確性高、靈敏度高、特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，目前已廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)研究和醫(yī)學(xué)研究等領(lǐng)域。熒光定量PCR原理在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累積，熒光信...

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PCR標(biāo)準(zhǔn)操作流程詳解

PCR標(biāo)準(zhǔn)操作流程詳解一、概述聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PolymeraseChainReaction，簡稱PCR）是一種在體外合成雙鏈DNA的技術(shù)。其原理模仿了天然DNA的復(fù)制過程，通過特異引物和高特異性酶，確保反應(yīng)的特異性。典型的PCR反應(yīng)包括三個步驟：變性、退火和延伸，通過多次循環(huán)，最終獲得目標(biāo)DNA片段。二、試劑準(zhǔn)備以下為進(jìn)行PCR反應(yīng)所需的試劑及其終濃度：試劑終濃度PCRbuffer1xdNTPsForwardprimerReverseprimerTemplateDNA熱啟動...

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細(xì)胞計數(shù)儀的選購技巧

在生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域，細(xì)胞計數(shù)儀是實驗室中重要的儀器設(shè)備，它主要用于快速、準(zhǔn)確地測量細(xì)胞濃度和活性。然而，面對市場上琳瑯滿目的細(xì)胞計數(shù)儀，如何挑選適合實驗室需求的設(shè)備成為許多研究人員面臨的難題。本文從多個角度出發(fā)，探討細(xì)胞計數(shù)儀的選購技巧，以確保實驗的準(zhǔn)確性和效率。一、細(xì)胞計數(shù)儀的分類及特點(diǎn)1.光學(xué)細(xì)胞計數(shù)儀：基于庫爾特原理，通過檢測細(xì)胞對光束的遮擋程度來計算細(xì)胞數(shù)量。優(yōu)點(diǎn)是準(zhǔn)確性高，適用于大多數(shù)細(xì)胞類型；缺點(diǎn)是操作較為復(fù)雜，對樣品要求較高。2.電阻抗細(xì)胞計數(shù)儀：利用細(xì)胞在通過...

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PCR儀的退火溫度如何選擇

在分子生物學(xué)實驗中，PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是一種常用的技術(shù)，用于擴(kuò)增特定的DNA片段。退火溫度是指在PCR循環(huán)中，引物與模板DNA結(jié)合形成雙鏈DNA的溫度。選擇合適的退火溫度可以提高PCR的效率和特異性，避免非特異性擴(kuò)增。那么在使用PCR儀進(jìn)行實驗時，如何選擇合適的退火溫度？在選擇退火溫度時，需要考慮以下幾個因素：1.引物序列：引物的序列對退火溫度有重要影響。引物序列的GC含量越高，退火溫度通常越高。這是因為GC堿基對之間的氫鍵數(shù)量更多，因此需要更高的溫度來斷裂這些氫鍵。相...

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高壓均質(zhì)機(jī)在藥品生產(chǎn)中的作用

藥品生產(chǎn)過程中，品質(zhì)控制至關(guān)重要。高壓均質(zhì)機(jī)作為現(xiàn)代藥品生產(chǎn)的關(guān)鍵設(shè)備，以其高效、精確的均質(zhì)化處理，為藥品的品質(zhì)提供了堅實的保障。本文將為您詳細(xì)介紹高壓均質(zhì)機(jī)在藥品生產(chǎn)中的作用，以及它如何助力藥品生產(chǎn)企業(yè)實現(xiàn)高質(zhì)量發(fā)展。一、高壓均質(zhì)機(jī)的原理與優(yōu)勢高壓均質(zhì)機(jī)，顧名思義，是一種利用高壓作用對物料進(jìn)行均質(zhì)化的設(shè)備。其工作原理是利用高壓泵將物料輸送至高壓均質(zhì)閥，在高壓均質(zhì)閥內(nèi)，物料受到強(qiáng)大的壓力作用，產(chǎn)生空穴效應(yīng)、撞擊效應(yīng)和剪切效應(yīng)，從而實現(xiàn)物料的均質(zhì)化處理。高壓均質(zhì)機(jī)在藥品生產(chǎn)中的...

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